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Caspase 8活性細胞凋亡檢測試劑盒(綠色)

簡要描述:Caspase 8活性細胞凋亡檢測試劑盒(綠色)是通過測量Caspase 8的活性而用于細胞凋亡檢測的,使(Ac-IETD)2-R110作為熒光指示器來檢測caspas-8的活性,通過caspas-8的切割R110肽產生強綠色熒光,其發射光在520 nm和530 nm之間,激發光為480 nm和500 nm之間。這種特性使得試劑盒能適合于FITC濾光器。

  • 產品型號:AC12L064
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2022-06-01
  • 訪  問  量:218

詳細介紹

品牌自營品牌貨號AC12L064
規格200T供貨周期現貨
主要用途通過測量Caspase 8的活性而用于細胞凋亡檢測應用領域生物產業
Caspase 8活性細胞凋亡檢測試劑盒綠色

產品信息
  Caspase 8活性細胞凋亡檢測試劑盒是通過測量Caspase 8的活性而用于細胞凋亡檢測的。Caspase 8 是一種Caspase蛋白,CASP8基因所編碼。在神經元變性疾病中,例如亨廷頓綜合癥,caspase 8扮演著重要角色。Caspase 8已被證明具有底物選擇性,其肽基序為Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。該試劑盒使(Ac-IETD)2-R110作為熒光指示器來檢測caspas-8的活性。通過caspas-8的切割R110肽產生強綠色熒光,其發射光在520 nm和530 nm之間,激發光為480 nm和500 nm之間。這種特性使得試劑盒能適合于FITC濾光器。
產品優勢
  本試劑盒提供所有必需組分和合適的操作流程。該實驗結果穩定,快速且適應高通量篩選。它不僅能夠定量凋亡細胞中caspas-8的活性還能篩選caspas-8的抑制劑。
技術資料
1.Ex(nm):500
2.Em(nm):522
訂購信息

產品名稱

貨號

規格

價格

Caspase 8活性細胞凋亡檢測試劑盒綠色

AC12L064

200T

2980


產品組分

產品組分規格
A: Caspase 3/7 Substrate (200X Stock Solution)50ul*2
B: Assay Buffer20ml

實驗方案
1.用測試化合物(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)制備細胞。
2.加入等體積的Caspase 8工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)。
3.在室溫下孵育30分鐘至1小時。
4.監測Ex / Em = 490/525 nm處的熒光增加(截止= 515 nm)。

5.將50μLCaspase8底物(組分A)加入10mL測定緩沖液(組分B)中并充分混合以制備Caspase 8工作溶液溶液需避光保存。
【注】:Caspasae 8工作液不穩定,請及時使用。 
操作步驟
1.通過將10μL/孔的10X測試化合物(96孔板)或5μL/孔的5X測試化合物(384孔板)加入PBS或所需緩沖液中來處理細胞。對于空白孔(沒有細胞的培養基),加入相同量的化合物緩沖液。
2.將細胞板在5%CO 2,37℃培養箱中孵育所需的一段時間(對于用喜樹堿或星形孢菌素處理的Jurkat細胞,4-6小時)以誘導細胞凋亡。
3.加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的Caspase 8工作溶液。
4.將板在室溫下孵育30分鐘至1小時,避光。
【注】:如果需要,在室溫下加入Caspase 8工作溶液10分鐘前,向選定的樣品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制劑,以確認對caspase 8樣活性的抑制作用。
5.以800rpm離心細胞板(特別是對于非貼壁細胞)2分鐘(制動關閉)。
6.用熒光酶標儀在Ex / Em = 490 / 525nm(截止= 515nm)下監測熒光增加。
數據分析
   
圖1.使用Cell Meter Caspase 8活性細胞凋亡檢測試劑盒檢測Jurkat細胞中的caspase 8活性
 
  在Costar黑壁/透明底96孔板中以相同的一天以200,000個細胞/90μL/孔接種Jurkat細胞。 用或不用20μM喜樹堿處理細胞4小時。 加入半胱天冬酶8工作溶液(100μL/孔)并在室溫下溫育1小時。 使用FlexStation 酶標儀(Molecular Devices)在Ex / Em = 490 / 525nm(截止值= 515nm)下測量熒光強度。
注意事項
該產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。


 

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